У нас вы можете скачать гост 32064-13 статус в fb2, txt, PDF, EPUB, doc, rtf, jar, djvu, lrf!

Пробирку с селективной средой инокулируют 1 см 3 из пробирки, полученной по 4. На поверхность селективно-диагностической агаризоеанной среды высевают культуру, полученную по 4. Типичные колонии, полученные по 4. Для посева используют не менее трех последовательных разведений для анализа, отличающиеся между собой в 10 раз по массе или объему.

Пробирки с селективной средой инокулируют 1 см 3 из каждою посева, полученною ло4. Выделение типичных колоний, подтверждение принадлежности выделенных типичных колоний к бактериям семейства Enterobacteriaceae проводят по 4.

Определение наиболее вероятного числа — в соответствии с таблицей приложения ДБ. Количество высеваемого продукта или его разведения и среды должно быть в соотношении не менее чем 1: При увеличении массы или объема высеваемой пробы продукта допускается использование селективных жидких сред двойной концентрации. Подсчитывают на отобранных чашках количество выросших типичных колоний. Примечание — Дополнение введено в связи с тем.

Внесенный в чашки продукт или его разведения распределяют по поверхности селективно-диагностической агаризованной питательной среды стерильным шпателем.

Химические вещества, используемые для приготовления питательных сред и реактивов должны быть аналитического качества, а вода дистиллированной. Растворяют компоненты или дегидратированную основу среды в воде. Нагревают среду на слабом огне до кипения, кипятят 1—2 мин. Бриллиантовый зеленый переносят в фарфоровую ступку и постепенно растворяют в воде.

Раствор переливают в мерную колбу вместимостью см 3 и доводят водой до метки. Примечание — Пункт 6. Нейтральный красный переносят в фарфоровую ступку и постепенно растворяют в воде. Кристаллический фиолетовый переносят в фарфоровую ступку и постепенно растворяют в воде. Примечание — Изменение режиме стерилизации среды введено в связи с тем. Пробирки после стерилизации оставляют в вертикальном положении. Бромкрезоловый пурпуровый переносят е фарфоровую ступку с 19 см 3 раствора гидроокиси натрия молярной концентрации с NaOH При нагревании растворяют компоненты е воде.

Нагревают на слабом огне до кипения, кипятят 1—2 мин. При нагревании все компоненты растворяют в воде. Разливают среду по 6. Среду готовят по ГОСТ Предусмотрено использование дополнительных питательных сред и реактивов. Реактив готовят непосредственно перед использованием. Для определения оксидазы допускается использование дисков и растворов, зарегистрированных в порядке, действующем на территории государства, принявшего стандарт, промышленного производства.

Для контроля качества дисков и растворов используют музейные оксидазоположи-тельные и оксидазоотрицатвльные культуры. Приемлемой альтернативой посуды многоразового применения является одноразовая посуда, если она отвечает соответствующим требованиям. Допускается использование флаконов или бутылок с нетоксичными металлическими или пластиковыми завинчивающимися крышками. Допускается применение других средств измерений, вспомогательного оборудования с аналогичными метрологическими и техническими характеристиками, а также материалов, по качеству не хуже указанных в разделе 7.

Для испытания должна быть отобрана и направлена представительная проба, не поврежденная и не измененная е ходе транспортирования или хранения. Примечание — Раздел 8 введен дополнительно в соответствии с требованиями межгосударственной стандартизации.

В зависимости от предполагаемой обсемекенности продукта бактериями семейства Enterobacteriaceae или нормативных значений х.

Соотношение количества высеваемого продукта и эабуференной пептонной воды соответственно 1: Пробирку с селективной средой инокулируют 1 см 3 из пробирки, полученной по 9. При непосредственном посеве продукта в селективную среду в зависимости от требуемых пределов выявления х. При испытании высококислотных продуктов для предотвращения резкого снижения pH на 0.

Допускается доводить pH до нейтрального значения с помощью стерильного раствора гидроокиси натрия непосредственно в высококислотном продукте. Посевы непосредственно в селективную среду инкубируют в течение 24—48 ч. Примечвние — Дополнение введено в связи с тем. Используя петлю, пересевают культуры с селективной питательной среды с признаками роста на поверхность одной из селективно-диагностических сред, приготовленных по 6.

На глюкозном агаре с желчью и фиолетовым красным бактерии семейства Enterobacteriaceae образуют колонии розовые, красные или пурпурные с ореолом или без него. На среде Эндо бактерии семейства Enterobacteriaceae образуют колонии темно-красные с металлическим блеском или без него, розовые, прозрачные. Из каждой инкубированной чашки см. Февраль года документов. Январь года документов. Декабрь года документов. Ноябрь года документов.

Октябрь года документов. Сентябрь года документов. Август года документов. Июль года документ. Стандарты за Июнь года. Общие требования к отбору проб. Если ссылочный стандарт отменен без замены, то положение, в котором дана ссылка на него, применяется в части, не затрагивающей эту ссылку.

В настоящем стандарте применены следующие термины с соответствующими определениями: Факультативно-анаэробные грамотрицательные палочки, не образующие спор , которые образуют типичные колонии на агаризованных селективно-диагностических средах, сбраживают глюкозу, с образованием или без образования газа , и дают отрицательную реакцию на оксидазу. Определение присутствия или отсутствия бактерий семейства Enterobacteriaceae в определенной массе или объеме продукта. Для посева используют не менее трех последовательных кратных разведений.

По 1 см исходной пробы и каждого последующего разведения вносят в жидкую неселективную среду не менее, чем в трех повторностях. Выбираемая последовательность разведений для посева зависит от предполагаемого уровня обсемененности продукта бактериями семейства Enterobacteriaceae или от нормативных значений.

Определение наиболее вероятного числа - в соответствии с таблицей приложения ДБ. Количество высеваемого продукта или его разведения и среды должно быть в соотношении не менее чем 1: При увеличении массы или объема высеваемой пробы продукта допускается использование селективных жидких сред двойной концентрации. Подсчитывают на отобранных чашках количество выросших типичных колоний.

При посеве методом мембранных фильтров на них подсчитывают колонии, если их менее Примечание - Дополнение введено в связи с тем, что поверхность мембранного фильтра намного меньше, чем чашки Петри.

Выбирают по три типичных колонии каждого типа для пересева на поверхность питательного агара для дальнейшего подтверждения принадлежности выросших культур к бактериям семейства Enterobacteriaceae.

Внесенный в чашки продукт или его разведения распределяют по поверхности селективно-диагностической агаризованной питательной среды стерильным шпателем. Химические вещества, используемые для приготовления питательных сред и реактивов должны быть аналитического качества, а вода дистиллированной. Среду разливают в стерильную посуду: Примечание - Дополнение введено в связи с тем, что использование сред двойной концентрации предусматривает добавление количества продукта или его разведения по объему, равному количеству среды, для этого должны использоваться пробирки большей вместимости.

Раствор переливают в мерную колбу вместимостью см и доводят водой до метки. Примечание - Пункт 6. Срок хранения расплавленной среды с момента ее приготовления - не более 4 ч.

Примечание - Пункты 6. Непосредственно перед использованием подсушивают поверхность среды в чашках Петри, предпочтительно при снятых крышках и поверхностью агара, смотрящей вниз, в сушильном шкафу до тех пор около 30 мин , пока на поверхности агара не останется влаги. Пробирки после стерилизации оставляют в вертикальном положении. Среду разливают по 6. Разливают среду по 6. Предусмотрено использование дополнительных питательных сред и реактивов, традиционно применяемых на территории государств, принявших стандарт, для выявления бактерий семейства Enterobacteriaceae.

Реактив готовят непосредственно перед использованием. Для определения оксидазы допускается использование дисков и растворов, зарегистрированных в порядке, действующем на территории государства, принявшего стандарт, промышленного производства.

Для контроля качества дисков и растворов используют музейные оксидазоположительные и оксидазоотрицательные культуры. Растворы и реактивы для окраски по Граму, а также растворы, приготовленные по 6. Приемлемой альтернативой посуды многоразового применения является одноразовая посуда, если она отвечает соответствующим требованиям. Допускается использование флаконов или бутылок с нетоксичными металлическими или пластиковыми завинчивающимися крышками.

Допускается применение других средств измерений, вспомогательного оборудования с аналогичными метрологическими и техническими характеристиками, а также материалов, по качеству не хуже указанных в разделе 7. Для испытания должна быть отобрана и направлена представительная проба, не поврежденная и не измененная в ходе транспортирования или хранения. Примечание - Раздел 8 введен дополнительно в соответствии с требованиями межгосударственной стандартизации.

Соотношение количества высеваемого продукта и забуференной пептонной воды соответственно 1: При непосредственном посеве продукта в селективную среду в зависимости от требуемых пределов выявления , см , жидкой пробы или , см , исходной суспензии при использовании других продуктов переносят в пробирку, содержащую 10 см обогатительной селективной среды двойной концентрации для 1 см 10 см , или в пробирку, содержащую 10 см обогатительной селективной среды нормальной концентрации для 1 см.

При испытании высококислотных продуктов для предотвращения резкого снижения рН на 0,5 и более питательных сред рН питательных сред после внесения в них продукта или его разведения доводят до допустимых значений с помощью стерильного раствора гидроокиси натрия, приготовленного по ГОСТ Количество добавляемого стерильного раствора гидроокиси натрия или величину, на которую необходимо увеличить рН при приготовлении питательных сред, устанавливают опытным путем.

Допускается доводить рН до нейтрального значения с помощью стерильного раствора гидроокиси натрия непосредственно в высококислотном продукте. Посевы непосредственно в селективную среду инкубируют в течение ч, через 24 ч проводят предварительный учет роста бактерий в среде, а через 48 ч - окончательный. Примечание - Дополнение введено в связи с тем, что подкисление сред проводят для создания оптимальных условий роста микроорганизмов.

На глюкозном агаре с желчью и фиолетовым красным бактерии семейства Enterobacteriaceae образуют колонии розовые, красные или пурпурные с ореолом или без него. На среде Эндо бактерии семейства Enterobacteriaceae образуют колонии темно-красные с металлическим блеском или без него, розовые, прозрачные. Из каждой инкубированной чашки см.

Бактерии семейства Enterobacteriaceae - грамотрицательные палочки. Если через несколько секунд взвесь ослизняется и за петлей тянутся слизистые нити, то это указывает на принадлежность испытуемой культуры к грамотрицательному виду. У грамположительных бактерий слизистых нитей не образуется. Примечание - Пункт 9.

Результат испытания считают отрицательным, если фильтровальная бумага на месте нанесения штрихов не посинела в течение 10 с. Бактерии семейства Enterobacteriaceae ферментируют глюкозу с образованием только кислоты цвет среды меняется или кислоты и газа. Готовят достаточное число разведений по ГОСТ , гарантируя, что все пробирки, соответствующие конечному разведению, покажут отрицательный результат.

Например, в каждую из трех пробирок с 9 см забуференнной пептонной воды вносят по 1 см продукта, если анализируемый продукт жидкий, или вносят по 10 см исходного разведения нежидкого продукта в колбу с 90 см забуференнной пептонной воды. В каждую из трех пробирок с 9 см забуференнной пептонной воды вносят по 1 см первого десятикратного разведения продукта, если исходный продукт жидкий, или вносят по 1 см исходного разведения продукта, в случае нежидкого продукта.